全内反射是一种光学现象，在MF53-TIRF显微镜中的意义是可以在样品表面形成200nm以内的极薄区域激发照明，从而大大降低背景荧光，提升信噪比。光线在特定角度下会形成完全反射，同时在反射面的另一面形成光强指数衰减的衰逝波，这就是全内反射的光学现象。

MF53-TIRF以衰逝波激发样品，由于其光强是指数衰减的，因此只有贴近玻片表面的样品部分会被激发，从而形成低背景荧光的高信噪比荧光成像，适合观察肌动蛋白、肌球蛋白和细胞膜相关样品。

全内反射荧光显微镜MF53-TIRF成像不需要经过扫描过程，使用简单方便，搭配sCMOS黑白科学相机成像的速度比共聚焦等方式更快，更适合用于观察肌动蛋白、肌球蛋白和细胞膜的动态过程。

MF53-TIRF标配高精度电动平台，提升样品移动和对焦精度，对焦模块还有自动锁焦功能，以便在长时间动态观察实验中自动跟踪目标，避免实验因样品失焦模糊而失败。